羅氏熒光定量PCR儀LightCycler480詳細介紹

一、適用范圍：臨床/科研中利用熒光定量PCR方法檢測目標基因，對其進行定量或者定性分析或進行基因分型或檢測突變，為臨床治療進行指導。
二、熒光定量PCR儀LightCycler 480 II性能總結
作為熒光定量技術的持有者，羅氏公司一直致力于為客戶提供性能優(yōu)秀的定量產品，羅氏LightCycler^® 480（以下簡稱LC-480）于2005年底面世，2006年開始在中國推廣，截至目前，已經在中國各研究及機構銷售達1000多臺，市場反應熱烈！
    LC-480是在總結了目前市場上現有熒光定量的特點后，結合Roche自身的技術優(yōu)勢研發(fā)出來，在以下幾個方面體現了的技術特色：
1．反應容器及檢測通量： 
    96孔，可選配升級為384孔反應模塊。用戶可自行更換，無需工程師到場。
 5色激發(fā)通道：290－800nm， 440，465，498，533，618nm； 6色熒光檢測通道： 488，510，588，610，640，660nm，適用多種熒光染料，開放性試劑，客戶可根據實際情況選擇ROCHE或其他廠家提供的試劑。
2．反應體積： 
96孔板： 10-100μl， 384孔板： 3-20μl，可節(jié)省實驗成本。
3．溫控系統（標準模式 ）：     
樣本升溫：4.8℃/秒，連續(xù)可調
均一性： +/-0.1℃（是板式定量PCR中溫度均一性好的產品）
準確性： +/-0.1℃
反應時間：不借助快速試劑，96孔＜60min，384孔＜­­40min
4．光學系統： 
4/1）采用白色固態(tài)光源，光強相對于氙燈更強，波長范圍為全波長，適用多種熒光染料，開放性試劑，客戶可跟據實際情況選擇ROCHE或其他廠家提供的試劑。
4/2）激發(fā)光經五角反射鏡減少光程差，消除光學邊緣效應。
4/3）熱蓋的設計減少孔間光學信號交叉，鄰近孔之間大交叉干擾<0.02%。顏色補償軟件及濾光片減少同一孔內的多種熒光染料的信號干擾，實現多重PCR方式。
5．線性范圍及檢測靈敏度：
定量動態(tài)范圍可達10⁰－10¹⁰，樣品無需稀釋，達到單拷貝基因的水平。
6．精確性及重復性：
孔間檢測的重復性為CV≤0.15%。可以區(qū)分1000與2000拷貝的差異，而且此項會作為裝機指標！
7．檢測模式:
熒光染料（SYBR Green等）、Taqman 探針、分子信標、 Scorpion，雜交探針、單探針等
8．軟件系統革新：
8/1）*的大二階導數法取Ct值。
8/2）考慮PCR實際擴增效率，而非武斷設定為2
8/3）含效率校正的相對定量軟件
8/4）高分辨率熔解曲線分析進行基因掃描等

 羅氏熒光定量PCR儀LightCycler480詳細介紹 特色功能：

1.HRM分析功能：
高分辨率熔解曲線 （High Resolution Melting, HRM）可以從更細致的程度研究雙鏈DNA的熱變性過程，從而獲取更多的信息量。HRM做為一種創(chuàng)新、均一、PCR擴增反應后進行的分析方法，可應用于對PCR擴增產物中SNP，基因突變和甲基化等基因變異檢測等廣泛的研究分析領域,如對食品中病源微生物的快速篩查與檢測等。
  憑借LightCycler® 480II系統*的基因掃描軟件和配套提供的高分辨率熔解曲線PCR反應即用型體系HRM PCR Master，羅氏診斷應用科學部*提供了基于模塊式定量PCR儀上的整合式基因掃描方案。
2. Universal Probe Library通用探針庫（＞5000000轉錄組）
只需要165個預制探針就完成上百萬種實時定量PCR實驗，對整個轉錄組進行高效研究。整套探針易于冰箱存儲，讓您的實時定量PCR檢測可靈活自在地進行。
UPL的165個探針選自轉錄組中高頻率出現的8-和9-堿基序列，確?？梢愿采w任意的一個轉錄組的全部轉錄子。
UPL探針僅8到9個核苷酸長，且含有Locked Nucleic Acids(LNA)。LNA是一類核糖2、4位羥基縮合形成氧橋的核酸類似物，這一特殊構像的核糖能夠促進堿基堆積及核糖預組織效應從而提高其熱穩(wěn)定性，使僅不到10個核苷酸長度的探針Tm值有顯著的提高，方便進行水解探針法的定量檢測。并且，含有LNA的UPL探針能夠辨別其他核酸探針無法區(qū)分的單堿基錯配，從而輕松保證您基因表達檢測的專一性要求。
3. RealTime ready 預制檢測板
這一系列的預制探針組合是用于多種qPCR檢測的即用預制微孔板，可直接用于檢測大量特定信號通路、代謝途徑或特定功能相關的基因表達情況。為方便使用，已預裝于LightCycler® 96-/384-孔板中，每一平板都含有目標特異的引物以及Universal Probe Library探針。您所需添加的只有預混酶液、水以及樣本cDNA，就可以獲得類似于微流體芯片的分析功能，整個過程更加直觀、簡便。如果您有已知需要檢測的基因，羅氏還支持為您在線定制專屬的預制檢測板，大化地節(jié)省您寶貴的時間。
除了信號通路、代謝途徑或特定功能相關的目標基因，每一預制平板上也包含了逆轉錄產物特異的對照以及內參基因用于簡化分析實驗數據。