(一) 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置

　　組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與其他一般實(shí)驗(yàn)室工作的主要區(qū)別在于要求保持無(wú)菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響.目前,超凈工作臺(tái)的廣泛使用，很大程度上方便了組織細(xì)胞培養(yǎng)工作，并使一些常規(guī)實(shí)驗(yàn)室有可能用于進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng).

　　細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)能進(jìn)行六方面的工作：無(wú)菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲(chǔ)藏。

　　1．無(wú)菌操作區(qū)

　　（1)無(wú)菌操作室：無(wú)菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無(wú)菌操作的區(qū)域，最好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。

　　理想的無(wú)菌操作室應(yīng)劃為三部分：

　　a）更衣室—―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

　　b）緩沖間—―位于更衣間與操作間之間，目的是為了保證操作間的無(wú)菌環(huán)境,同時(shí)可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。

　　c)無(wú)菌操作間—―專用于無(wú)菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)。其大小要適當(dāng)，且其頂部不宜過(guò)高(不超過(guò)2.5m）以保證紫外線的有效滅菌效果；墻壁光滑*以便清潔和消毒.工作臺(tái)安置不應(yīng)靠墻壁，臺(tái)面要光滑壓塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。

　　無(wú)菌操作間的空氣消毒:

　　紫外線燈—－產(chǎn)生臭氧，并且室內(nèi)溫度及濕度均較高，不利于工作人員健康。

　　空氣過(guò)濾的恒溫恒濕裝置—－最好。

　　表1潔凈室（區(qū)）空氣潔凈度級(jí)別表

　　潔凈度級(jí)別塵粒最大允許數(shù)／立方米微生物最大允許數(shù)浮游菌／立方米沉降菌／皿

　　100級(jí)3，500051

　　10000級(jí)350，0002，0001003

　　100000級(jí)3,500，00020,00050010

　　300000級(jí)10,350,00060,000-15

　　無(wú)臭氧紫外線消毒器

　　電子消毒滅菌器—－在高壓電場(chǎng)作用下，電子管的內(nèi)外電極發(fā)生強(qiáng)烈電子轟擊，使空氣電離而將空氣中的氧轉(zhuǎn)換成臭氧。臭氧是一種強(qiáng)氧化劑，能同細(xì)菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進(jìn)行氧化分解反應(yīng)，從而靠臭氧氣體彌漫性擴(kuò)散達(dá)到殺菌之目的，消毒時(shí)沒(méi)有死角。消毒后空間的殘留臭氧只需30～40min即能自行還原成氧氣,空氣不留異味，消毒物體表面不留殘毒。

　?。?）凈化工作臺(tái)：操作簡(jiǎn)單，安裝方便，占用空間小且凈化效果很好。一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種：a）側(cè)流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。

　　凈化工作臺(tái)工作原理(大致相同）-－通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾，由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱，再經(jīng)高效空氣過(guò)濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區(qū)，從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。

　　側(cè)流式工作臺(tái)—－空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過(guò)工作臺(tái)面流向?qū)?cè)，也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè)，形成氣流屏障保持工作區(qū)無(wú)菌。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為封閉式。

　　外流式(水平式)工作臺(tái)—－凈化后的空氣面向操作者流動(dòng)，因而外方氣流不致混入操作，但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作則對(duì)操作者不利。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為開(kāi)放式（已少用)。

　　凈化工作臺(tái)應(yīng)用注意：

　　(1）凈化工作臺(tái)應(yīng)安裝在隔離好的無(wú)菌間或清潔無(wú)塵的房間內(nèi)，以免塵土過(guò)多易使過(guò)濾器阻塞,降低凈化效果，縮短其使用壽命。

　?。?）新安裝的或長(zhǎng)期未使用的工作臺(tái)，工作前必須對(duì)工作臺(tái)和周圍環(huán)境用真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的工具進(jìn)行清潔工作,然后再采用藥物滅菌法或紫外線滅菌進(jìn)行滅菌處理。

　?。?）使用凈化工作臺(tái)前，應(yīng)先用75％酒精擦洗臺(tái)面，并提前以紫外線滅菌燈照射30~50min處理凈化工作區(qū)內(nèi)積存的微生物.關(guān)閉滅菌燈后應(yīng)啟動(dòng)風(fēng)機(jī)使之運(yùn)轉(zhuǎn)兩分鐘后再進(jìn)行培養(yǎng)操作。

　?。?）凈化工作區(qū)內(nèi)不應(yīng)存放不必要的物品，以保持潔凈氣流流型不受干擾。

　　(5）注意凈化區(qū)內(nèi)氣流的變化，一旦感到氣流變?nèi)酰缇凭珶艋鹧娌粍?dòng)，加大電機(jī)電壓仍未見(jiàn)情況改變則說(shuō)明濾器已被阻塞，應(yīng)及時(shí)更換。一般情況下，高效過(guò)濾器三年更換一次。更換高過(guò)濾器應(yīng)請(qǐng)專業(yè)人員操作，以保持密封良好。粗過(guò)濾器中的過(guò)濾布（無(wú)紡布）應(yīng)定期清洗更換，時(shí)間應(yīng)根據(jù)工作環(huán)境潔凈程度而定，通常間隔3—6個(gè)月進(jìn)行一次。

　?。?）凈化工作臺(tái)使用完畢應(yīng)及時(shí)清理工作臺(tái)面上的物品并用酒精擦洗臺(tái)面使之始終保持潔凈。

　?。?）凈化工作臺(tái)應(yīng)定期進(jìn)行功能測(cè)試，檢查凈化工作臺(tái)各項(xiàng)工作指標(biāo)是否達(dá)到要求,例如進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)，定期檢查臺(tái)面空氣的潔凈度是否達(dá)標(biāo).

　　超凈工作臺(tái)的無(wú)菌程度檢查超凈工作臺(tái)在消毒處理后，無(wú)菌試驗(yàn)前及操作過(guò)程中需檢查空氣中菌落數(shù)；取直徑約90mm平皿，在超凈工作臺(tái)內(nèi)點(diǎn)燃酒精燈，在酒精燈旁，以無(wú)菌操作，將平皿半開(kāi)注入溶化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約20ml，制成平板，在30~35℃預(yù)培養(yǎng)48小時(shí)，證明無(wú)菌后將平板3個(gè)，以無(wú)菌方式帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)左、中、右各放一個(gè);打開(kāi)平皿蓋扣置,平板在空氣中暴露30分鐘后將平皿蓋蓋好，置30～35℃培養(yǎng)48小時(shí)，取出檢查，100級(jí)清潔度要求：3個(gè)平皿上生長(zhǎng)的菌落數(shù)平均不得超過(guò)1個(gè).

　　超凈工作臺(tái)應(yīng)定期請(qǐng)有關(guān)部門檢查其潔凈度，應(yīng)達(dá)到100級(jí)（一般用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀）檢測(cè)塵埃粒徑≤5祄的粒數(shù)不得超過(guò)3。5個(gè)／升；空氣流量應(yīng)控制在0.75~1.0m3/s;細(xì)菌菌落數(shù)平均<1個(gè)，可根據(jù)無(wú)菌狀況必要時(shí)置換過(guò)濾器。

　　2．孵育區(qū)

　　本區(qū)對(duì)無(wú)菌的要求雖不比無(wú)菌區(qū)嚴(yán)格，但仍需清潔無(wú)塵，因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來(lái)往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行，后者費(fèi)用高，一般實(shí)驗(yàn)室多采用孵箱進(jìn)行工作.

　　3．制備區(qū)

　　在該區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。

　　4．儲(chǔ)藏區(qū)

　　主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無(wú)菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等，此環(huán)境也需要清潔無(wú)塵.

　　5．清洗和消毒滅菌區(qū)

　　清潔和消毒滅菌區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開(kāi)，主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作。

　　(二）細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備

　　組織細(xì)胞培養(yǎng)室除一般實(shí)驗(yàn)室的普通常規(guī)設(shè)備外，尚有一些特殊需要的設(shè)備?；究煞譃閮纱箢悾旱谝活悶槌Ｓ玫幕驹O(shè)備;第二類為較高級(jí)的特殊設(shè)備.

　　1。常用的基本設(shè)備

　?。?)儀器：

　　a）顯微鏡：倒置顯微鏡—-是組織細(xì)胞培養(yǎng)室所必需的日常工作常規(guī)使用設(shè)備之一，便于掌握細(xì)胞的生長(zhǎng)情況并觀察有無(wú)污染等。

　　——若有條件，尚可配置帶有照相系統(tǒng)的高質(zhì)量相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時(shí)電影拍攝裝置等，以便隨時(shí)觀察、記錄、攝影細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

　　a）培養(yǎng)箱：體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，大多數(shù)情況下，最適溫度是37℃,溫差變化一般不應(yīng)超過(guò)±0。5℃，細(xì)胞在溫度升高2℃時(shí)，持續(xù)數(shù)小時(shí)即不能耐受，40℃以上將很快死亡.因此需要有能控制溫度的培養(yǎng)箱，如具有較高靈敏度的恒溫培養(yǎng)箱及CO2培養(yǎng)箱。

　　恒溫培養(yǎng)箱——應(yīng)選隔水式或晶體管自控溫培養(yǎng)箱，此類培養(yǎng)箱靈敏度高，溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價(jià)格較便宜,其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養(yǎng)。

　　CO2培養(yǎng)箱—-目前多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所需要的一定量的CO2（常用濃度為5%)，易于使培養(yǎng)液的pH保持穩(wěn)定,適用于開(kāi)放或半開(kāi)放培養(yǎng)。培養(yǎng)細(xì)胞的器皿可用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶；當(dāng)使用培養(yǎng)瓶時(shí),可將瓶蓋略微旋松，使培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)與外界保持通氣狀態(tài)。由于這種培養(yǎng)方法培養(yǎng)器皿內(nèi)部與外界相通，培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須保持清潔，應(yīng)定期以紫外線照射或酒精消毒。同時(shí)培養(yǎng)箱應(yīng)放置盛有無(wú)菌蒸餾水的水槽，防止培養(yǎng)液蒸發(fā),使箱內(nèi)相對(duì)濕度始終保持為100％。

　　c）干燥箱：用于細(xì)胞培養(yǎng)箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒.干熱消毒時(shí)，電熱干燥箱升溫較高，一般需達(dá)到160℃以上。通常使用鼓風(fēng)式電熱干燥箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始，至100℃時(shí)，停止鼓風(fēng)，應(yīng)避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。消毒后,不能立即打開(kāi)箱門以免驟冷而導(dǎo)致玻璃器皿損壞，應(yīng)等候溫度自然下降至100℃以下方可開(kāi)門。

　　d）水純化裝置：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)水的質(zhì)量要求較高，細(xì)胞培養(yǎng)以及與細(xì)胞培養(yǎng)工作相關(guān)的液體的配制用水必須事先嚴(yán)格純化處理。水純化時(shí)可采用離子交換裝置或蒸餾器。離子交換純水尚不能有效去除有機(jī)物，因此用水時(shí)尚需再次蒸餾。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)配制各種培養(yǎng)液及試劑等均需使用三次蒸餾水:即使是用于玻璃器皿的沖洗，也應(yīng)使用二次以上蒸餾水.

　　目前國(guó)內(nèi)使用較多的是自動(dòng)雙重純水蒸餾器（石英管加熱）,使用方便，安全、蒸餾速度快（1600ml/h）。

　　使用注意：

　　○a不可采用普通自來(lái)水蒸餾，以免蒸餾器內(nèi)很快結(jié)成水垢影響蒸餾效果;同時(shí),還需視蒸餾器內(nèi)存水垢程度定期*清洗蒸餾器.

　　○b正確的使用方法是將經(jīng)金屬蒸餾器蒸餾的蒸餾水加入玻璃蒸餾器內(nèi)進(jìn)行再次蒸餾。

　　一般配制培養(yǎng)液的用水應(yīng)在配液前蒸餾，不宜使用存放數(shù)日的三蒸水，以免影響培養(yǎng)用水的質(zhì)量.

　　目前市場(chǎng)上供應(yīng)的是含有各種級(jí)別和類型的采用一種或多種純化方法相結(jié)合的使普通水純化為純水和超純水的純水系統(tǒng)可供選擇。例如：設(shè)計(jì)靈活的可以掛壁、也可為臺(tái)式，也可以有儲(chǔ)水箱、也可直接用分液槍的純水裝置；還可根據(jù)各類實(shí)驗(yàn)用水需求選擇配備有效殺菌或去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，甚至可有效去除掉熱源、內(nèi)毒素的超濾型純水器。

　　e）冰箱：細(xì)胞培養(yǎng)室必須配備

　　○a普通冰箱或冷藏柜

　　—-儲(chǔ)存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hank’s液試劑等培養(yǎng)用的物品及短期保存組織標(biāo)本。

　　○b低溫冰箱（—20℃）、超低溫冰箱

　　—-用于儲(chǔ)存需要冷凍保存生物活性及較長(zhǎng)時(shí)期存放的制劑,如酶、血清等。

　　——細(xì)胞培養(yǎng)室的冰箱應(yīng)屬專用，不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對(duì)細(xì)胞有害的物質(zhì)，且應(yīng)保持清潔。

　　f）細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器：儲(chǔ)存器常用的是液氮容器。根據(jù)使用需要分為不同的類型及多種規(guī)格。選擇購(gòu)置液氮容器時(shí)要綜合考慮容積大小,取放使用方便及液氮揮發(fā)量（經(jīng)濟(jì)）三種因素.液氮容器的大小可自25L～500L，可以儲(chǔ)存1ml的安瓿250～15000個(gè)左右。液氮溫度可低達(dá)-196℃，使用時(shí)應(yīng)防止凍傷。由于液氮不斷揮發(fā)，應(yīng)注意觀察存留液氮情況，及時(shí)定期補(bǔ)充液氮，避免揮發(fā)過(guò)多而致細(xì)胞受損。

　　目前，國(guó)內(nèi)各類實(shí)驗(yàn)室已廣泛使用新型的細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器。市場(chǎng)所提供的各種新型的細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器具有性能優(yōu)異，使用方便等特點(diǎn).例如：

　　——可通過(guò)*電子控制器實(shí)現(xiàn)凍存自動(dòng)化并監(jiān)測(cè)液氮水平和樣品溫度，確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點(diǎn)；

　　-—可配備*報(bào)警系統(tǒng),分別警報(bào)液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況：

　　——同時(shí)具備熱氣體旁路系統(tǒng),防止高于-130℃的暖空氣進(jìn)入液氮罐，從而更有效地保護(hù)樣品,防止升溫.

　　另外,多種規(guī)格的*液氮運(yùn)輸，供應(yīng)罐系列不僅移動(dòng)方便,還可通過(guò)連接管給儲(chǔ)存罐補(bǔ)充液氮，提高工作效率，保證樣品安全。

　　g）離心機(jī)：進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，常規(guī)需要進(jìn)行制備細(xì)胞懸液、調(diào)整細(xì)胞密度、洗滌、收集細(xì)胞等工作，通常需要使用離心機(jī).

　　○a一般可常規(guī)配置4000rpm的國(guó)產(chǎn)臺(tái)式離心機(jī)，例如細(xì)胞沉降，使用80～100g的離心機(jī)即可，離心力過(guò)大有時(shí)可能引起細(xì)胞的損傷。

　　○b另外，可根據(jù)需要添置其他類型如大容量或可調(diào)節(jié)溫度的離心機(jī)等

　　○c若需特殊用途,例如某些細(xì)胞的分離制備需梯度離心，則需另行配置實(shí)驗(yàn)所需的具備其他特殊功能的離心機(jī)。

　　h）天平：常用的有扭力天平、精密天平及各種電子天平。

　　分析天平的感量為0。1mg、0。01mg和0.001mg。根據(jù)稱取物質(zhì)的量和稱量精度的要求，選擇適宜級(jí)別的天平。要求精密稱定時(shí)，當(dāng)取樣量大于100mg選用感量為0.1mg天平，在100－10mg選用感量為0.01mg天平，小于10mg選用感量為0。001mg天平。

　　i）消毒器:直接或間接與細(xì)胞接觸的物品均需消毒滅菌處理。

　　常用:○a手提式高壓蒸汽消毒器

　　○b目前市場(chǎng)上，具有高效、安全、方便等性能,適用于各種器皿、液體、培養(yǎng)基的高壓滅菌裝置已在流通（如脈動(dòng)真空滅菌器）?？晒┦褂谜咴跍缇耐瑫r(shí)監(jiān)測(cè)滅菌容器內(nèi)的壓力和溫度，確保滅菌質(zhì)量和安全,并可通過(guò)記憶（儲(chǔ)存)支持系統(tǒng)改變各種參數(shù)（例如滅菌、排氣、加熱等參數(shù)），即使在進(jìn)行滅菌時(shí)發(fā)生停電故障，仍可保留所設(shè)定的參數(shù)

　　j）濾器:目前細(xì)胞培養(yǎng)工作中采用的培養(yǎng)用液，包括人工合成培養(yǎng)液、血清、消化用胰酶等常含有維生素、蛋白、多肽、生長(zhǎng)因子等物質(zhì)，這些物質(zhì)在高溫或射線照射下易發(fā)生變性或失去功能，因而上述液體多采用濾過(guò)消毒以除去細(xì)菌。

　　目前常使用的濾器有Zeiss濾器、玻璃濾器和微孔濾器,各種濾器有其使用原理和特點(diǎn)（后詳述).

　　(2）培養(yǎng)用器皿：

　　a）培養(yǎng)器皿：供細(xì)胞接種、生長(zhǎng)等用的器皿,可由透明度好、無(wú)毒的中性硬質(zhì)玻璃或無(wú)毒而透明光滑的特制塑料制成。

　?。╝）玻璃培養(yǎng)器皿的優(yōu)點(diǎn)是多數(shù)細(xì)胞均可生長(zhǎng)，易于清洗、消毒，可反復(fù)使用,并且透明而便于觀察;缺點(diǎn)是易碎,清洗時(shí)費(fèi)人力。

　　(b）塑料制培養(yǎng)器皿的優(yōu)點(diǎn)是一次性使用，廠家已消毒滅菌密封包裝，打開(kāi)即可用于細(xì)胞培養(yǎng)操作。

　　常用的培養(yǎng)器皿：

　　培養(yǎng)瓶：由玻璃或塑料制成。主要用于培養(yǎng)、繁殖細(xì)胞。進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)瓶瓶口加蓋螺旋瓶蓋或膠塞，膠塞多用于密封培養(yǎng)。國(guó)產(chǎn)培養(yǎng)瓶的規(guī)格以容量（ml)表示，如250ml、100ml、25ml等；進(jìn)口培養(yǎng)瓶則多以底面積(cm2）表示。

　　培養(yǎng)皿:由玻璃或塑料制成，供盛取、分離、處理組織或做細(xì)胞毒性、集落形成、單細(xì)胞分離、同位素?fù)饺?、?xì)胞繁殖等實(shí)驗(yàn)使用.常用的培養(yǎng)皿規(guī)格有10cm、9cm、6cm、3.5cm等.

　　多孔培養(yǎng)板：為塑料制品?？晒┘?xì)胞克隆及細(xì)胞毒性等各種檢測(cè)實(shí)驗(yàn)使用。其優(yōu)點(diǎn)是節(jié)約樣本及試劑，可同時(shí)測(cè)試大量樣本，易于進(jìn)行無(wú)菌操作。培養(yǎng)板分為各種規(guī)格，常用的規(guī)格有：96孔、24孔、12孔、6孔、4孔等。

　　各種單層生長(zhǎng)的細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中長(zhǎng)滿時(shí)可獲得的細(xì)胞數(shù),主要是取決于器皿的底表面積和細(xì)胞體積的大小。常用培養(yǎng)器皿及可獲得的細(xì)胞數(shù)（以Hela細(xì)胞為例）見(jiàn)表2.

　　表2常用的培養(yǎng)器皿及可獲得的細(xì)胞數(shù)

　　培養(yǎng)器皿底面(cm2）加培養(yǎng)液量（ml)可獲細(xì)胞量

　　96孔培養(yǎng)板0.320.11×105

　　24孔培養(yǎng)板21。05×105

　　12孔培養(yǎng)板4。52.01×106

　　6孔培養(yǎng)板9.62。52。5×106

　　4孔培養(yǎng)板285。07×106

　　3.5cm培養(yǎng)皿83.02.0×106

　　6cm培養(yǎng)皿215。05.2×106

　　9cm培養(yǎng)皿4910.012.2×106

　　10cm培養(yǎng)皿5510。013。7×106

　　25cm塑料培養(yǎng)瓶255.05×106

　　75cm塑料培養(yǎng)瓶7515～302×107

　　25ml玻璃培養(yǎng)瓶194。03×106

　　100ml玻璃培養(yǎng)瓶37.510。06×106

　　250ml玻璃培養(yǎng)瓶7815。07×107

　　2500ml旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶700100～2502。0×108

　　b）培養(yǎng)操作有關(guān)的器皿：

　　○a貯液瓶：主要用于存放或配制各種培養(yǎng)用液體如培養(yǎng)液、血清及試劑等。貯液瓶分為各種不同規(guī)格，如1000ml、500ml、250ml、100ml、50ml、5ml等。

　　○b吸管：主要分為刻度吸管、無(wú)刻度吸管?？潭任苤饕糜谖?、轉(zhuǎn)移液體，常用的有1ml、2ml、5ml、10ml等規(guī)格。無(wú)刻度吸管分為直頭吸管及彎頭吸管，除可以作吸取、轉(zhuǎn)移液體外，彎頭尖吸管還常用于吹打、混勻及傳代細(xì)胞。

　　○c加樣器（移液器）：用于吸取、移動(dòng)液體或滴加樣本?？筛鶕?jù)需要調(diào)節(jié)量的大小，吸量準(zhǔn)確、方便。尤以微量加樣器,可保證實(shí)驗(yàn)樣品(或試劑）含量精確,重復(fù)性良好。目前，可高溫消毒的，多通道的各類移液器可供使用者選擇,能確保加樣準(zhǔn)確、快速、方便并且達(dá)到無(wú)菌要求.

　　c）其他用品：尚有收集細(xì)胞用的離心管，放置試劑或臨時(shí)插置吸管用的試管，裝放吸管以便消毒的玻璃或不銹鋼容器,用于存放小件培養(yǎng)物品便于高壓消毒的鋁制飯盒或貯槽,套于吸管頂部的橡膠吸頭，封閉各種瓶、管的膠塞、蓋子、凍存細(xì)胞用的安瓿或凍存管、不同規(guī)格的注射器、燒杯和量筒以及漏斗，超凈工作臺(tái)使用的酒精燈，供實(shí)驗(yàn)人員操作前清潔消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型噴壺等。

　　(3)器械:主要用于解剖、取材、剪切組織及操作時(shí)持取物件。常用的有：手術(shù)刀或解剖刀、手術(shù)剪或解剖剪（彎剪及直剪），用于解剖動(dòng)物、分離及切剪組織,制備原代培養(yǎng)的材料；眼科虹膜小剪(彎剪或直剪），用于將組織材料剪成小塊;血管鉗及組織鑷、眼科鑷(彎、直），用于持取無(wú)菌物品（如小蓋玻片）夾持組織等；口腔科探針或代用品,用以放置原代培養(yǎng)之組織小塊。

　　2、特殊設(shè)備

　　細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室除了應(yīng)配備上述的常用基本設(shè)備以外，如有條件,可添置一些特殊或*設(shè)備儀器,以便更有效、更精確、更深入地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室工作。例如：

　?。?）酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀—-可用于進(jìn)行免疫學(xué)測(cè)定及細(xì)胞毒性、藥物敏感性檢測(cè)等。

　?。?）超低溫冰箱（-85℃）——便于儲(chǔ)存某些試劑及標(biāo)本。

　　(3）旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)器——用于某些特殊細(xì)胞或需要收獲大量細(xì)胞的培養(yǎng)。

　　（4）熒光顯微鏡——進(jìn)行熒光染色樣本的觀察。

　　（5）流式細(xì)胞儀-—可更精確及快速檢測(cè)細(xì)胞。

　?。?)用于檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)條件的各種儀器,例如專門為快速分析細(xì)胞培養(yǎng)基中主要或關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分、代謝產(chǎn)物及氣體含量設(shè)計(jì)的多功能細(xì)胞培養(yǎng)分析儀、手提式CO2濃度測(cè)定儀等。